Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
mitoNEET Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424640-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mitoNEETO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mitoNEET (m) e o Plasmídeo Double Nickase mitoNEET (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cisd1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mitoNEET Anticorpo (AT1A8): sc-517413
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mitoNEET Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424640-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mitoNEET Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424640-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Cisd1 do camundongo codifica a mitoNEET, uma proteína ligante de clusters [2Fe–2S] ancorada à membrana mitocondrial externa, que participa da transferência de clusters ferro‑enxofre, da regulação redox e da coordenação da bioenergética mitocondrial com o estado metabólico celular. A mitoNEET influencia a morfologia mitocondrial e a capacidade oxidativa, interagindo com vias que controlam o manejo de espécies reativas de oxigênio, a utilização de lipídios e a homeostase do ferro. A desregulação de processos associados a CISD1/mitoNEET tem sido relacionada na literatura a disfunção metabólica, respostas ao estresse mitocondrial e fenótipos relevantes para neurodegeneração, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização mitocondrial. Em modelos murinos, a perturbação de Cisd1 pode ser explorada para investigar como o controle redox na membrana mitocondrial externa molda a fisiologia celular em tecidos com alta demanda metabólica.
mitoNEET O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cisd1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cisd1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cisd1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cisd1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.