MIF Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421649-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIFO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MIF (m) e o Plasmídeo Double Nickase MIF (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mif. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIF Anticorpo (D-2): sc-271631
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIF Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421649-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MIF Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421649-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator inibidor da migração de macrófagos (MIF) é uma citocina pleiotrópica codificada pelo gene Mif em camundongos, que regula respostas imunes inatas e adaptativas, o tráfego de leucócitos e a sinalização de estresse. O MIF interage com CD74/CD44 e com receptores de quimiocinas como CXCR2/CXCR4 para coordenar a atividade das vias MAPK e NF-κB, moldando a produção de citocinas e programas de sobrevivência celular. Ele também se relaciona com a contrarregulação por glicocorticoides e com o controle redox, conectando sinais inflamatórios a desfechos metabólicos e proliferativos. A desregulação da sinalização de MIF tem sido implicada em inflamação crônica, autoimunidade e remodelação imune associada a tumores, tornando o Mif um alvo frequente de estudos mecanísticos em imunologia e biologia do câncer.
MIF O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mif em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mif. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mif. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mif interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.