MIB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404769-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MIB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MIB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MIB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIB1 Anticorpo (D-6): sc-393551
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404769-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MIB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404769-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MIB1 codifica a mindbomb E3 ubiquitin protein ligase 1, uma ligase de ubiquitina E3 do tipo RING que ubiquitina ligantes de Notch como DLL1 e JAG1 para promover a endocitose do ligante e a ativação produtiva do receptor Notch. Ao regular a amplitude e o timing da sinalização de Notch, MIB1 influencia decisões de destino celular, diferenciação e padronização tecidual, com efeitos a jusante sobre programas transcricionais que controlam a proliferação e o comprometimento de linhagem. MIB1 também se cruza com a homeostase do sistema ubiquitina–proteassoma e com vias de tráfego endocítico que moldam a dinâmica receptor–ligante na superfície celular. Perturbações genéticas e funcionais de MIB1 têm sido associadas a alterações na sinalização do desenvolvimento e a fenótipos relevantes para doenças, inclusive em contextos em que a desregulação da via Notch contribui para a biologia oncogênica e cardiovascular.
MIB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MIB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MIB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MIB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MIB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.