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Mfn2/Mitofusin 2双切口酶质粒(m) | sc-431291-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mfn2(Mitofusin 2)是一种动态蛋白样的 GTP 酶,锚定在线粒体外膜上,介导线粒体融合,并帮助维持小鼠细胞中线粒体网络的结构。除膜系牵连(tethering)之外,MFN2 还参与线粒体–内质网接触位点,这些位点协调钙离子处理、脂质交换以及线粒体生物能学,使其与细胞应激反应和代谢调控相关联。Mfn2 的扰动会破坏线粒体动力学,并可能改变线粒体自噬、活性氧(ROS)平衡以及对凋亡的敏感性。这些功能使 Mfn2 成为研究神经退行性变、心脏代谢功能障碍以及炎症相关线粒体重塑(包括体内研究和培养的小鼠系统)中广泛使用的靶点。
Mfn2/Mitofusin 2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mfn2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mfn2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mfn2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mfn2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。