非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
使用 Mfn1 抗体 (D-10) Alexa Fluor® 680: sc-166644 AF680 检测 Caki-1 全细胞裂解液中 Mfn1 的表达, 使用 β-Actin (C4) Alexa Fluor® 790: sc-47778 AF790 检测 Caki-1 全细胞裂解液中 β-Actin 的表达. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Mfn1/Mitofusin 1双切口酶质粒(h): sc-400637-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Mfn1/Mitofusin 1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Mfn1/Mitofusin 1双切酶质粒（h）和Mfn1/Mitofusin 1双切酶质粒（h2）编码针对MFN1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Mfn1/Mitofusin 1: sc-166644，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Mfn1/Mitofusin 1双切口酶质粒(h) | sc-400637-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mfn1/Mitofusin 1双切口酶质粒(h2) | sc-400637-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MFN1 编码线粒体融合蛋白 1（Mitofusin 1，Mfn1），这是一种嵌入线粒体外膜的类 dynamin GTP 酶，介导线粒体融合并有助于维持线粒体网络结构。Mfn1 通过与 MFN2 进行同源或异源寡聚化，并与 OPA1 依赖的内膜融合相耦联，从而影响线粒体动态变化、嵴（cristae）结构组织以及生物能量输出。MFN1 的活性还与线粒体自噬、凋亡信号传导以及内质网–线粒体接触位点的调控相交织，从而塑造细胞对代谢应激和质量控制的响应。机制研究表明，涉及 MFN1 的线粒体融合–分裂平衡失调与神经退行性变、心脏代谢功能障碍以及癌症相关的代谢重编程有关。
Mfn1/Mitofusin 1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MFN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MFN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MFN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MFN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。