METTL14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406936-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- METTL14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase METTL14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase METTL14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para METTL14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
METTL14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406936-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
METTL14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406936-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL14 codifica um componente central do complexo “escritor” da metiltransferase de RNA N6-metiladenosina (m6A), atuando em parceria com a METTL3 e com proteínas adaptadoras como a WTAP para depositar marcas de m6A em mRNA e outros RNAs. Essas modificações epitranscriptômicas regulam o splicing do RNA, a exportação nuclear, a estabilidade e a tradução, moldando assim programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular, proliferação e respostas ao estresse. A sinalização de m6A dependente de METTL14 cruza-se com vias que governam respostas a danos no DNA, “stemness” e regulação da imunidade inata por meio de alterações no turnover de transcritos e no output translacional. A atividade ou expressão desregulada de METTL14 tem sido associada a um controle anômalo, do tipo epigenético, de redes oncogênicas e de desenvolvimento, tornando-o um alvo comum em estudos mecanísticos de biologia tumoral e diferenciação.
METTL14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus METTL14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de METTL14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função METTL14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com METTL14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.