Meis1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401481

概要

MEIS1は、TALE型ホメオボックス転写因子であるMeis1をコードしており、HOXおよびPBXタンパク質と協調して、胚発生におけるパターン形成、造血分化、ならびに細胞運命決定を司る遺伝子発現プログラムを制御します。Meis1は、増殖、系譜（ライン）特異化、幹／前駆細胞の維持に関与するクロマチン関連の転写ネットワークに影響を与え、組織によって文脈依存的な役割を担います。MEIS1の制御異常は、造血の破綻や白血病における腫瘍性転写回路と関連づけられており、また遺伝学的関連解析により、むずむず脚症候群などの神経生物学関連形質へのMEIS1の関与も示唆されています。核内の制御因子として、MEIS1は発生における遺伝子制御ネットワークや転写因子間の協調作用を研究するためのモデルとして広く用いられています。

Meis1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMEIS1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MEIS1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MEIS1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Meis1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Meis1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MEIS1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Meis1の機能に不可欠なMEIS1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MEIS1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Meis1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMeis1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MEIS1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Meis1 HDRプラスミド（h）および Meis1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMEIS1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMEIS1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。