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MECL-1双切口酶质粒(h2) | sc-402101-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类PSMB10基因编码蛋白酶体β型10亚基(MECL-1),它是免疫蛋白酶体的一种可诱导催化组分,在炎症信号作用下替换构成型β亚基,从而重塑蛋白水解切割偏好。MECL-1支持由泛素–蛋白酶体系统介导的蛋白质周转,并增强MHC I类抗原加工,将干扰素驱动的应答与适应性免疫监视相连接,同时调控与NF-κB相关的蛋白稳态(proteostasis)程序。免疫蛋白酶体的组成或活性失衡与抗原呈递改变以及慢性免疫激活有关,这些现象常见于自身免疫、感染和肿瘤免疫逃逸等情境。对PSMB10进行基因编辑可用于在人类细胞模型中机制性解析免疫蛋白酶体依赖的肽库、细胞因子压力下的蛋白质组质量控制,以及免疫通路的重塑。
MECL-1 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PSMB10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PSMB10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PSMB10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PSMB10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。