MCC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404248-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCC (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MCC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCC Anticorpo (A-9): sc-398216
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404248-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404248-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O MCC humano codifica a proteína Mutated in Colorectal Cancers, um fator citoplasmático e nuclear implicado na regulação da progressão do ciclo celular, da diferenciação e da homeostase do tecido epitelial. O MCC tem sido associado a processos relacionados à via Wnt/β-catenina e ao controle transcricional, com funções descritas na contenção de sinais proliferativos e na coordenação de respostas ligadas a checkpoints. Alterações na expressão do MCC ou mutações são observadas em diversos tipos de tumor, incluindo o câncer colorretal, e foram associadas a mudanças em fenótipos de migração, polaridade e estabilidade genômica relevantes para a transformação oncogênica. Como alvo de pesquisa, o MCC permite a investigação mecanística de redes de sinalização que conectam programas transcricionais à proliferação e à arquitetura tecidual.
MCC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MCC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MCC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MCC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MCC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.