MC5-R Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403844-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MC5-RO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MC5-R (h) e o Plasmídeo Double Nickase MC5-R (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MC5R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MC5-R Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403844-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MC5-R Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403844-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O MC5R humano codifica o receptor de melanocortina 5 (MC5-R), um receptor acoplado à proteína G ativado por peptídeos melanocortínicos como a α-MSH e o ACTH. O MC5-R sinaliza principalmente via Gs para elevar o cAMP intracelular e acionar programas de transcrição dependentes de PKA/CREB, com efeitos a jusante sobre o metabolismo celular, a atividade secretória e a modulação imune de maneira dependente do tecido. A atividade do MC5R tem sido associada à regulação da função de glândulas exócrinas, do manejo de lipídios e da sinalização inflamatória, e alterações no tônus da via melanocortínica são estudadas no contexto de distúrbios metabólicos e imunorrelacionados. Como os receptores de melanocortina integram sinais neuroendócrinos a respostas periféricas, o MC5R serve como um nó útil para dissecar a dinâmica de sinalização de GPCRs e redes gênicas controladas por cAMP.
MC5-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MC5R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MC5R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MC5R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MC5R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.