Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MBD4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403156-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MBD4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MBD4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MBD4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MBD4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MBD4 Anticorpo (D-6): sc-271530
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MBD4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403156-NIC | 20 µg | $410.00 |
MBD4 (proteína 4 contendo domínio de ligação a metil-CpG) é uma glicosilase de DNA que reconhece incompatibilidades G:T e G:U decorrentes da desaminação de citosinas metiladas e inicia o reparo por excisão de base para preservar a integridade de CpG. Por meio do seu domínio de ligação a metil-CpG e da interação com a maquinaria de reparo de incompatibilidades (mismatch repair), a MBD4 conecta o contexto epigenético à vigilância do genoma e ajuda a limitar o acúmulo de mutações em loci metilados. A disrupção da função de MBD4 está associada a assinaturas elevadas de transições C>T e a fenótipos de instabilidade de microssatélites, ligando essa via a mecanismos de instabilidade genômica observados em múltiplos tipos de câncer. Como resultado, a MBD4 é amplamente estudada em pesquisas sobre reparo de DNA, processos mutacionais e manutenção do epigenoma.
MBD4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MBD4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MBD4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MBD4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MBD4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.