Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MaxiKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403096
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MaxiKβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MaxiKβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MaxiKβ Anticorpo (A-5): sc-377023
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MaxiKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403096 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNMB1 codifica a subunidade regulatória β1 de canais de potássio BK/MaxiK (de grande condutância), ativados por Ca²⁺ e por voltagem, comumente denominada MaxiKβ. Ao aumentar a sensibilidade dos canais BK ao Ca²⁺ e modificar a cinética de abertura/fechamento (gating), a MaxiKβ molda a excitabilidade da membrana, a dinâmica intracelular de Ca²⁺ e o tônus do músculo liso. Essa atividade moduladora integra-se a vias que controlam a reatividade vascular, a contratilidade das vias aéreas e o manejo renal de eletrólitos, com efeitos a jusante na sinalização ligada a NO/cGMP e em processos dependentes de Ca²⁺. Alterações na função ou na expressão de KCNMB1 têm sido associadas à desregulação do controle da pressão arterial, a fenótipos de hipercontratilidade do músculo liso e a distúrbios mais amplos relacionados à excitabilidade.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MaxiKβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNMB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNMB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNMB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MaxiKβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNMB1 para a investigação da sinalização de MaxiKβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNMB1 críticos para a função MaxiKβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNMB1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MaxiKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MaxiKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNMB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MaxiKβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MaxiKβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNMB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNMB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.