Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MaxiKα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402208-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MaxiKαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MaxiKα (h) e o Plasmídeo Double Nickase MaxiKα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNMA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MaxiKα Anticorpo (B-1): sc-374142
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MaxiKα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402208-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MaxiKα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402208-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNMA1 codifica a subunidade α humana do canal de potássio MaxiK (BK, KCa1.1), de grande condutância, ativado por voltagem e por Ca2+, um regulador central da excitabilidade de membrana e da sinalização intracelular de cálcio. Ao acoplar aumentos de Ca2+ citosólico e a despolarização ao efluxo de K+, a MaxiKα molda a repolarização do potencial de ação, a liberação de neurotransmissores, o tônus do músculo liso e a mecanotransdução em muitos tipos celulares. A função do canal é integrada a vias de sinalização de GPCRs e quinases e é fortemente modulada por subunidades auxiliares β/γ e por microdomínios locais de Ca2+. A atividade desregulada de KCNMA1 ou alterações no gating (mecanismo de abertura/fechamento) do canal têm sido associadas a fenótipos neurológicos, incluindo epilepsia e distúrbios do movimento, e a alterações funcionais na fisiologia vascular e das vias aéreas, relevantes para a pesquisa cardiopulmonar.
MaxiKα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNMA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNMA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNMA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNMA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.