Matrilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406830

Visão geral

MATN1 codifica a matrilina-1, uma proteína adaptadora da matriz extracelular enriquecida na cartilagem que ajuda a organizar a matriz pericelular ao ligar colágenos e proteoglicanos em redes supramoleculares. A matrilina-1 contribui para a diferenciação dos condrócitos, a integridade estrutural da cartilagem e a montagem da matriz extracelular durante a esqueletogênese e a ossificação endocondral. Por meio de seus domínios modulares e da capacidade de multimerização, participa de processos de remodelação da matriz que influenciam a biomecânica do tecido e a sinalização célula–matriz. Alterações na expressão de MATN1 ou na organização da matriz são estudadas no contexto da degeneração da cartilagem e de distúrbios esqueléticos e articulares hereditários ou adquiridos, nos quais a homeostase da matriz extracelular está comprometida.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Matrilin-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MATN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MATN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MATN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Matrilin-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MATN1 para a investigação da sinalização de Matrilin-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MATN1 críticos para a função Matrilin-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MATN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Matrilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Matrilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MATN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Matrilin-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Matrilin-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MATN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MATN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.