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MAT IIα双切口酶质粒(h) | sc-402566-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAT IIα双切口酶质粒(h2) | sc-402566-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAT2A 编码蛋氨酸腺苷转移酶 II(MAT IIα)的催化 α 亚基,该酶负责合成 S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)。SAM 是 DNA、RNA 以及组蛋白甲基化反应的主要甲基供体。通过调控细胞内 SAM 的可用性,MAT IIα 将蛋氨酸循环与一碳代谢连接到表观遗传调控、多胺生物合成,并通过硫转移途径(transsulfuration)参与维持氧化还原平衡。MAT2A 的活性与细胞增殖程序及营养感知状态紧密耦联,因此与代谢适应和染色质依赖的基因调控研究密切相关。多种疾病背景(包括肿瘤代谢和肝脏相关病理生理过程)中均有 MAT2A 表达改变或对其依赖性变化的报道,这也支持将其作为研究甲基化驱动表型的一个分子抓手。
MAT IIα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAT2A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAT2A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAT2A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAT2A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。