MAT Iα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419102

概要

Mat1aはメチオニンアデノシルトランスフェラーゼIα（MAT Iα）をコードしており、これはS-アデノシル-L-メチオニン（SAM）の合成を触媒する主要な肝臓酵素です。SAMは、DNA・RNA・タンパク質・脂質のメチル化反応における主要なメチル基供与体です。MAT IαはSAM/SAHバランスを制御することで、メチオニン代謝をワンカーボン代謝、トランススルフuration（硫黄転移経路）、およびレドックス恒常性に結び付け、エピジェネティック制御と全体的なメチル化能に影響を与えます。MAT1A活性の変化は、メチル化依存的な遺伝子発現プログラムの破綻や代謝ストレス応答と関連しており、肝臓生理、肝細胞分化、ならびに代謝機能不全の機構研究において重要です。

MAT Iα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMat1a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mat1a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mat1aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MAT Iαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MAT Iαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mat1a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MAT Iαの機能に不可欠なMat1aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mat1aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MAT Iα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMAT Iα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mat1a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MAT Iα HDRプラスミド（m）および MAT Iα HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMat1aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMat1a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。