Mast Cell Protease 5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421601

개요

Cma1은 쥐 비만세포 프로테아제 5(mouse mast cell protease 5)를 암호화하며, 이는 키마아제(chymase) 계열의 세린 프로테아제로 결합조직형 비만세포의 분비 과립에 저장되어 있다가 FcεRI 신호에 의해 탈과립(degranulation) 시 방출됩니다. 비만세포 프로테아제 5는 펩타이드와 사이토카인 관련 기질을 단백질분해적으로 처리함으로써 세포외기질 재형성과 혈관활성 및 염증촉진 매개물질의 조절에 관여하고, 그 결과 백혈구 유입과 조직 반응을 형성합니다. 이러한 작용을 통해 알레르기성 염증, 기도 과민반응, 조직 섬유화의 기저 경로에 기여하며, 피부 염증 및 심폐 리모델링 모델에서 자주 연구됩니다. 비만세포 프로테아제 5 활성의 변화는 염증성 질환 환경에서 선천–적응 면역 간 상호작용과 장벽 조직 항상성의 변화와 연관되는 것으로 보고되어 왔습니다.

Mast Cell Protease 5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cma1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cma1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cma1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Mast Cell Protease 5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Mast Cell Protease 5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cma1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Mast Cell Protease 5 기능에 중요한 Cma1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cma1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Mast Cell Protease 5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Mast Cell Protease 5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cma1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Mast Cell Protease 5 HDR 플라스미드 (m) 및 Mast Cell Protease 5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cma1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cma1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.