MARK3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406362

개요

MARK3(미세소관 친화성 조절 키나아제 3)는 PAR-1/MARK 계열에 속하는 세린/트레오닌 키나아제로, tau를 포함한 미세소관 결합 단백질을 인산화하여 미세소관 역학과 세포 극성을 조절합니다. 이는 극성 조절 신호의 하위에서 기능하며, 세포골격 재구성, 소포 수송, 세포주기 진행을 제어하는 경로들과 교차합니다. 신경 형태형성과 축삭-수상돌기(specification) 결정에서의 역할을 통해, MARK3 활성이 조절 이상을 보이면 비정상적인 tau 인산화 및 신경퇴행 관련 과정과 연관되는 것으로 보고되었습니다. MARK3는 또한 상피 세포에서의 극성 소실 및 이동성 변화 맥락에서도 연구되며, 이때 미세소관 불안정성이 질병 관련 세포 표현형에 기여합니다.

MARK3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MARK3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MARK3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MARK3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MARK3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MARK3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MARK3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MARK3 기능에 중요한 MARK3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MARK3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MARK3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MARK3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MARK3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MARK3 HDR 플라스미드 (h) 및 MARK3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MARK3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MARK3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.