MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405516

概要

MAGEC2はメラノーマ関連抗原C2（MAGE-C2）をコードしており、MAGE-C2は、正常では主に生殖細胞系組織に限局して発現し、多様な腫瘍で高頻度に再発現するがん精巣抗原です。MAGE-C2は、RINGドメインを有するパートナーとの相互作用を介したE3リガーゼ活性の調節など、ユビキチン依存性の過程に関与することでタンパク質恒常性に寄与し、シグナル伝達因子や細胞周期制御因子の安定性に影響を及ぼします。MAGE-C2の発現異常は、悪性進展や免疫認識に関連する増殖能、ストレス応答、転写プログラムの変化と関連づけられています。腫瘍関連抗原として、抗原提示の文脈や、腫瘍の表現型および経路の再配線を反映する分子指標として広く研究されています。

MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMAGEC2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MAGEC2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MAGEC2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MAGE-C2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MAGE-C2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MAGEC2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MAGE-C2の機能に不可欠なMAGEC2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MAGEC2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMAGE-C2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MAGEC2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MAGE-C2 HDRプラスミド（h）および MAGE-C2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMAGEC2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMAGEC2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。