LysRS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404110-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LysRSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LysRS (h) e o Plasmídeo Double Nickase LysRS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KARS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LysRS Anticorpo (A-10): sc-271331
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LysRS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404110-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LysRS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404110-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KARS codifica a lisil-tRNA sintetase humana (LysRS), uma aminoacil-tRNA sintetase de classe II que liga a lisina ao seu tRNA cognato (tRNA^Lys), garantindo a fidelidade da tradução e sustentando a homeostase do proteoma. Para além do seu papel canônico na síntese proteica no citosol, a LysRS tem sido implicada em processos ligados à sinalização por meio de localização regulada e de interações proteína–proteína que conectam a tradução às respostas celulares ao estresse. A perturbação da função das aminoacil-tRNA sintetases pode alterar a proteostase, a sinalização integrada de estresse e programas de estado celular que são frequentemente investigados em modelos de neurodesenvolvimento, neurodegeneração e biologia do câncer. A atividade ou expressão desregulada de KARS também é relevante para a coordenação mitocôndria–citosol da expressão gênica e para a adaptação metabólica, tornando-o um nó útil para estudar mecanismos centrados na tradução.
LysRS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KARS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KARS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KARS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KARS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.