LXR beta/NER/NR1H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423617

Visão geral

Nr1h2 codifica o receptor X do fígado beta (LXRβ/NER), um receptor nuclear ativado por ligante que atua como regulador transcricional da homeostase de lipídios e colesterol. Em células de camundongo, o LXRβ forma heterodímeros com RXR para modular genes que controlam o transporte reverso de colesterol, o metabolismo de ácidos graxos e programas gênicos inflamatórios, integrando a sinalização metabólica e da imunidade inata. Essa via se cruza com a polarização de macrófagos, a biologia de adipócitos e respostas neuroinflamatórias, ligando a atividade de Nr1h2 a mecanismos relevantes para aterosclerose, disfunção metabólica e fenótipos inflamatórios do SNC em modelos experimentais. Como o LXRβ influencia redes de transcrição em múltiplos tecidos, a perturbação de Nr1h2 é amplamente utilizada para dissecar o crosstalk entre receptores nucleares e a regulação gênica dependente de ligante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LXR beta/NER/NR1H2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nr1h2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nr1h2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nr1h2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LXR beta/NER/NR1H2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nr1h2 para a investigação da sinalização de LXR beta/NER/NR1H2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nr1h2 críticos para a função LXR beta/NER/NR1H2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nr1h2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LXR beta/NER/NR1H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LXR beta/NER/NR1H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nr1h2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LXR beta/NER/NR1H2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LXR beta/NER/NR1H2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nr1h2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nr1h2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.