LTRPC7 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402820-LAC

TRPM7 (LTRPC7) codifica um canal‑quinase único que conduz cátions divalentes, particularmente Mg²⁺ e Ca²⁺, ao mesmo tempo que acopla o fluxo iónico a um domínio citosólico de quinase de serina/treonina. Ao regular a homeostase intracelular do magnésio, a dinâmica do citoesqueleto e a sinalização dependente de Ca²⁺, o TRPM7 influencia processos como proliferação celular, migração, mecanotransdução e respostas celulares ao stress. A atividade do TRPM7 interage com vias ligadas à excitabilidade da membrana e a redes de sinalização mediadas por quinases, que moldam a sinalização inflamatória e a adaptação metabólica. A desregulação da expressão ou função do TRPM7 tem sido associada a lesão neurológica e neurodegeneração, remodelação cardiovascular e alterações do comportamento de crescimento em múltiplos contextos de cancro, tornando-o um nó relevante para estudos de genómica funcional centrados em vias.

As Partículas de Ativação Lentivirais LTRPC7 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TRPM7 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais LTRPC7 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TRPM7, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de LTRPC7. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TRPM7 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.