Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LSDP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426297
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LSDP5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LSDP5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LSDP5 Anticorpo (E-3): sc-514296
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LSDP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426297 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A Perilipina 5 (Plin5), também conhecida como proteína 5 das gotículas de armazenamento de lipídios (LSDP5), é uma proteína associada a gotículas lipídicas que regula o armazenamento intracelular de triacilgliceróis e coordena o tráfego de ácidos graxos para as mitocôndrias para a β-oxidação. Em tecidos oxidativos de camundongos, como coração, fígado e músculo esquelético, a PLIN5 ajuda a equilibrar o sequestro de lipídios com a lipólise ao modular o acesso de lipases à superfície da gotícula e ao acoplar a mobilização de lipídios à capacidade oxidativa mitocondrial. Por meio dessas funções, a PLIN5 influencia a homeostase energética, a sinalização induzida por lipídios e as respostas celulares à disponibilidade de nutrientes e ao jejum. A desregulação da dinâmica das gotículas lipídicas ligada à PLIN5 é relevante em modelos experimentais de esteatose, resistência à insulina e estresse lipotóxico que afetam a função mitocondrial e fenótipos metabólicos associados à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LSDP5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Plin5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Plin5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Plin5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LSDP5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Plin5 para a investigação da sinalização de LSDP5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Plin5 críticos para a função LSDP5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Plin5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LSDP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LSDP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Plin5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LSDP5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LSDP5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Plin5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Plin5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.