LRP6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400844-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRP6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRP6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LRP6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LRP6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRP6 Anticorpo (C-10): sc-25317
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRP6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400844-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRP6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400844-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP6 (proteína 6 relacionada ao receptor de lipoproteínas de baixa densidade) é um correceptor transmembrana de passagem única que conecta ligantes WNT e receptores Frizzled para ativar a sinalização WNT/β-catenina canônica. Por meio de fosforilação dependente de ligante e recrutamento de AXIN, o LRP6 regula a estabilização da β-catenina, programas transcricionais que controlam proliferação, diferenciação e homeostase tecidual, e o crosstalk com vias que governam a polaridade celular e o metabolismo. A atividade ou expressão desregulada de LRP6 tem sido associada a alterações na dinâmica da sinalização WNT observadas em transtornos do desenvolvimento e em múltiplos contextos de doença, incluindo a biologia do câncer e fenótipos metabólicos. Como resultado, o LRP6 é amplamente estudado por seus papéis na montagem do complexo receptor, no controle da sinalização associada à endocitose e na saída transcricional de genes-alvo β-catenina/TCF.
LRP6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LRP6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LRP6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LRP6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LRP6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.