LRP1B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404088-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRP1BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRP1B (h) e o Plasmídeo Double Nickase LRP1B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LRP1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRP1B Anticorpo (1642CT736.5.59): sc-517340
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRP1B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404088-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRP1B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404088-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP1B codifica um grande receptor endocítico da família dos receptores de LDL que participa da internalização mediada por clatrina e do tráfego de ligantes extracelulares e de complexos receptor–ligante. Por meio de suas funções na renovação da membrana e na reciclagem de receptores, o LRP1B pode influenciar a atividade de proteases na superfície celular, as interações com a matriz extracelular e redes de sinalização a jusante associadas à adesão e à migração celular. Alterações na função de LRP1B têm sido associadas à desregulação da homeostase celular e a assinaturas de instabilidade genômica observadas em múltiplos tipos tumorais. Como resultado, o LRP1B é frequentemente estudado no contexto da biologia epitelial, da genética do câncer e dos mecanismos que governam a captação mediada por receptores e a modulação da sinalização.
LRP1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LRP1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LRP1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LRP1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LRP1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.