Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421462
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRF/Pokemon O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LRF/Pokemon, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRF/Pokemon Anticorpo (13E9): sc-33683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421462 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Zbtb7a codifica LRF/Pokemon, um fator de transcrição com dedo de zinco do tipo BTB/POZ que regula o comprometimento de linhagem, a proliferação e a sobrevivência por meio da ligação ao DNA de forma específica por sequência e do recrutamento de complexos correpressores. Em contextos hematopoéticos e imunes, ajuda a coordenar programas de desenvolvimento de células B e T, influencia a maturação eritroide e modula redes transcricionais associadas à diferenciação. LRF/Pokemon interage com vias que controlam checkpoints do ciclo celular e respostas ao estresse, incluindo antagonismo funcional da sinalização supressora tumoral ARF–p53, e pode remodelar estados de cromatina em loci-alvo. Alterações na atividade de Zbtb7a têm sido implicadas em programas transcricionais oncogênicos e fenótipos de diferenciação anormais em modelos de neoplasias hematológicas e tumores sólidos, tornando-o um nó relevante para estudos mecanísticos de tumorigênese e controle do destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LRF/Pokemon (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zbtb7a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zbtb7a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zbtb7a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LRF/Pokemon.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zbtb7a para a investigação da sinalização de LRF/Pokemon, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zbtb7a críticos para a função LRF/Pokemon
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zbtb7a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zbtb7a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LRF/Pokemon Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LRF/Pokemon (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zbtb7a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zbtb7a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.