LONP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411273-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LONP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LONP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LONP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LONP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LONP1 Anticorpo (3B2): sc-293244
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LONP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411273-NIC | 20 µg | $410.00 |
O LONP1 codifica uma protease dependente de ATP da matriz mitocondrial (LonP1) que mantém a proteostase ao reconhecer, desenrolar e degradar proteínas mal dobradas ou danificadas por oxidação. Ele sustenta o controle de qualidade mitocondrial, a manutenção do mtDNA e a resposta mitocondrial a proteínas desenoveladas, influenciando assim a eficiência da fosforilação oxidativa, o manejo de ROS e a sinalização adaptativa ao estresse. A função do LONP1 se cruza com a biogênese mitocondrial e com processos relacionados à mitofagia que preservam a integridade da organela sob estresse metabólico ou proteotóxico. A atividade desregulada de LONP1 tem sido associada a fenótipos de disfunção mitocondrial e é estudada em contextos de neurodegeneração, estresse cardiometabólico e adaptação de células tumorais a bioenergética alterada.
LONP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LONP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LONP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LONP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LONP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.