LOC147645 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406583

Visão geral

VSIG10L (LOC147645) codifica uma proteína prevista contendo um domínio V-set e domínios de imunoglobulina, que se espera localizar na superfície celular e participar de interações célula–célula ou célula–matriz. Com base na arquitetura de domínios e na homologia com outros membros da superfamília das imunoglobulinas, VSIG10L está implicado em programas de adesão epitelial e na regulação da arquitetura tecidual, processos que se cruzam com diferenciação, função de barreira e redes de sinalização associadas à migração. Variações na expressão de proteínas relacionadas com domínios Ig são frequentemente associadas a interações alteradas com o microambiente tumoral e a características metastáticas, tornando VSIG10L um alvo candidato para estudos mecanísticos em biologia do câncer e remodelamento epitelial. Assim, a investigação funcional de LOC147645 pode esclarecer vias que governam a sinalização dependente de adesão e a plasticidade fenotípica celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LOC147645 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene VSIG10L em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do VSIG10L, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do VSIG10L na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LOC147645.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de VSIG10L para a investigação da sinalização de LOC147645, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) VSIG10L críticos para a função LOC147645
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos VSIG10L para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LOC147645 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LOC147645 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus VSIG10L. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LOC147645 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LOC147645 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia VSIG10L para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo VSIG10L definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.