LNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403866

Visão geral

PDZRN3 codifica a LNX3, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING contendo domínio PDZ, implicada no controle dependente de ubiquitina da estabilidade e do tráfego de proteínas. Por meio de suas interações de ancoragem mediadas por PDZ e de sua atividade de ubiquitinação dependente de RING, a LNX3 está posicionada para regular a arquitetura de redes de sinalização na membrana plasmática e em compartimentos juncionais ou do citoesqueleto, influenciando processos como polaridade celular, dinâmica de adesão e programas de diferenciação. PDZRN3/LNX3 tem sido associada a vias envolvidas no padrão de desenvolvimento e na remodelação tecidual, nas quais alterações na sinalização por ubiquitina podem modificar saídas transcricionais e transições de estado celular. A desregulação da expressão de PDZRN3 ou da ubiquitinação mediada por LNX3 foi relatada em contextos relevantes para doenças, incluindo controle anormal do crescimento e remodelação fibrótica ou inflamatória, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de sinalização e proteostase.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LNX3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDZRN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDZRN3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDZRN3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LNX3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDZRN3 para a investigação da sinalização de LNX3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDZRN3 críticos para a função LNX3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDZRN3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LNX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDZRN3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LNX3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LNX3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDZRN3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDZRN3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.