Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LLH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422311
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LLH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LLH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LLH1 Anticorpo (B-5): sc-271640
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LLH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422311 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Plod1 codifica a lisil-hidroxilase 1 (LLH1), uma enzima do retículo endoplasmático que hidroxila resíduos específicos de lisina em procolágenos, permitindo a glicosilação subsequente e estabilizando as ligações cruzadas do colágeno. Por meio da regulação da maturação do colágeno e da organização da matriz extracelular, a LLH1 influencia a integridade do tecido conjuntivo, a estrutura da membrana basal e vias de remodelamento tecidual. A perturbação da atividade de Plod1 está associada à fibrilogênese anormal do colágeno e à mecânica da matriz, processos relevantes para a biologia da fibrose, para fenótipos de fragilidade vascular e cutânea e para estudos do microambiente tumoral em modelos murinos. Como resultado, Plod1 é comumente investigado em contextos de sinalização dirigida pela MEC, interações célula–matriz e mecanotransdução.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LLH1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Plod1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Plod1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Plod1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LLH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Plod1 para a investigação da sinalização de LLH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Plod1 críticos para a função LLH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Plod1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LLH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LLH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Plod1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LLH1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LLH1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Plod1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Plod1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.