Date published: 2026-10-26

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LIMK-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401057-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • LIMK-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase LIMK-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LIMK-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIMK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LIMK-1 Anticorpo (H-12): sc-515585
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    LIMK-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-401057-NIC
    20 µg
    $410.00

    LIMK-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-401057-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    LIMK1 codifica a LIMK-1, uma quinase de serina/treonina que regula a dinâmica do citoesqueleto de actina ao fosforilar e inibir a cofilina, controlando assim a renovação dos filamentos, a montagem de fibras de estresse e a motilidade celular. A LIMK-1 atua a jusante da sinalização de GTPases da família Rho pelas vias ROCK e PAK, integrando sinais que moldam a adesão, a migração e o crescimento de neuritos. Por seu papel na remodelação do citoesqueleto, a LIMK1 é estudada em processos como plasticidade sináptica e morfogênese, e sua desregulação tem sido implicada em programas de invasão oncogênica e em fenótipos do neurodesenvolvimento. Essas conexões de vias tornam a LIMK1 um alvo útil para dissecar redes de sinalização dependentes de actina e comportamentos celulares impulsionados pelo citoesqueleto.

    LIMK-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIMK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIMK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIMK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIMK1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.