LIGHT Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424539-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LIGHTO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LIGHT (m) e o Plasmídeo Double Nickase LIGHT (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tnfsf14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LIGHT Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424539-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Tnfsf14** codifica a LIGHT (TNFSF14), uma citocina de membrana do tipo II da superfamília TNF que sinaliza por meio de HVEM (TNFRSF14) e LTβR (TNFRSF3) para modular a ativação de células imunes e a inflamação tecidual. A LIGHT influencia programas transcricionais dependentes de NF-κB e MAPK que moldam a coestimulação de células T, a função de células dendríticas e a comunicação entre estroma e sistema imune. Em modelos murinos, a sinalização desregulada de LIGHT tem sido associada a patologia inflamatória e ao remodelamento tecidual mediado pelo sistema imune, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de autoimunidade, infecção e interações entre tumor e imunidade. Essas vias tornam **Tnfsf14** um alvo relevante para dissecar a regulação, dirigida por citocinas, da organização linfoide e da imunidade em sítios de barreira.
LIGHT O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tnfsf14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tnfsf14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tnfsf14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tnfsf14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.