LHX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421428
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LHX5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LHX5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LHX5 Anticorpo (KP-02): sc-130469
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LHX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421428 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Lhx5 codifica o fator de transcrição homeobox com domínio LIM LHX5, um regulador nuclear de ligação ao DNA necessário para o estabelecimento de padrões e a diferenciação do sistema nervoso central em desenvolvimento. Em camundongos, o LHX5 contribui para a identidade regional e a especificação de linhagens neuronais por meio de programas transcricionais dependentes do domínio LIM, que se cruzam com redes homeobox mais amplas que controlam a neurogênese e a orientação axonal. Alterações na atividade de LHX5 estão associadas a defeitos no desenvolvimento do prosencéfalo e do hipocampo e a fenótipos do neurodesenvolvimento consequentes, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos da formação de circuitos neurais. Como regulador transcricional, o LHX5 influencia cascatas de expressão gênica a jusante que moldam decisões de destino celular e estados de maturação em progenitores neurais e neurônios em diferenciação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LHX5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lhx5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lhx5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lhx5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LHX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lhx5 para a investigação da sinalização de LHX5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lhx5 críticos para a função LHX5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lhx5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LHX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LHX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lhx5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LHX5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LHX5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lhx5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lhx5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.