LHPP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-429326-LAC
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- LHPP as Partículas de Ativação Lentiviral (m) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- LHPP As partículas de ativação lentivirais (m) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo LHPP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m) e pelo LHPP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Lhpp. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: LHPP Anticorpo (B-2): sc-376648
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LHPP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m) | sc-429326-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
LHPP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m2) | sc-429326-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
O gene Lhpp em camundongo codifica a LHPP, uma fosfatase de histidina do tipo haloacid dehalogenase–like que regula a fosforilação de histidina em proteínas, uma modificação pós-traducional implicada em sinalização, dinâmica do citoesqueleto e controle metabólico. Ao desfosforilar substratos de fosfo-histidina, a LHPP pode influenciar o equilíbrio entre quinases e fosfatases e as vias a jusante que moldam a proliferação e as respostas celulares ao estresse. Alterações na atividade da LHPP têm sido associadas na literatura a programas de crescimento desregulados e à reprogramação metabólica em contextos relevantes para doenças, tornando Lhpp um locus útil para estudos mecanísticos em células de mamíferos. Investigar a função da LHPP apoia pesquisas sobre redes de fosfo-sinalização nas quais a fosforilação de histidina é difícil de medir e frequentemente pouco explorada.
As Partículas de Ativação Lentivirais LHPP (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Lhpp numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais LHPP (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Lhpp, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de LHPP. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Lhpp e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.