LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420320-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LGR5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LGR5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LGR5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lgr5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420320-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420320-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lgr5 codifica o receptor 5 acoplado à proteína G contendo repetições ricas em leucina (LGR5), um marcador-chave de populações de células-tronco adultas e um potenciador da sinalização WNT/β-catenina por meio da ligação a ligantes R-spondin. Em tecidos de camundongo, células LGR5-positivas contribuem para a homeostase e a regeneração epiteliais ao influenciar programas de autorrenovação, comprometimento de linhagem e proliferação. A atividade de LGR5 interage com vias que regulam a pluripotência/“stemness” e a diferenciação, incluindo redes transcricionais dirigidas por WNT e sinais de nicho específicos de cada tecido. A expressão ou a sinalização de Lgr5 desreguladas é frequentemente investigada em modelos de dinâmica aberrante de criptas/vilosidades, biologia de iniciação tumoral e comportamento de crescimento de organoides, sem implicar desfechos clínicos.
LGR5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lgr5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lgr5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lgr5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lgr5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.