LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400726-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LGR5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LGR5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LGR5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LGR5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LGR5 Anticorpo (634J2E): sc-517661
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400726-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LGR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400726-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LGR5 (receptor acoplado à proteína G 5 contendo repetições ricas em leucina) é um receptor de superfície celular responsivo à via WNT/β-catenina, amplamente utilizado como marcador de populações de células-tronco adultas e progenitoras em tecidos epiteliais. Em conjunto com as R-spondinas e os receptores Frizzled/LRP, o LGR5 potencializa a sinalização WNT canônica para regular a autorrenovação, a homeostase cripta–vilosidade e o comprometimento de linhagem. A desregulação da sinalização associada ao LGR5 tem sido vinculada a estados “stem-like” alterados, proliferação aberrante e mudanças em programas de diferenciação observadas em diversos contextos de tumores sólidos. Essas propriedades tornam o LGR5 um alvo útil para dissecar a dinâmica de células-tronco, a sinalização do nicho e a modulação da via WNT em modelos celulares humanos.
LGR5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LGR5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LGR5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LGR5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LGR5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.