LEREPO4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-427290

概要

Zc3h15は、マウスのタンパク質LEREPO4をコードしており、mRNAの安定性、プロセシング、翻訳の制御を含む転写後遺伝子制御に関与すると考えられる、亜鉛フィンガー型のRNA結合因子（予測）です。RNAの運命を規定することで、Zc3h15はシグナル依存的な転写出力や、増殖、分化、ストレス応答といった細胞プログラムに影響し得る位置づけにあります。RNA結合タンパク質および関連するリボ核タンパク質複合体の機能異常は、免疫シグナルの変化や腫瘍性表現型と広く関連しているため、Zc3h15は遺伝子発現制御の機構解明研究において重要なノードとなります。マウスのモデル系では、Zc3h15を改変することで、RNAを中心とした制御が経路活性や細胞状態遷移をどのように調節するかを検討できます。

LEREPO4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZc3h15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zc3h15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zc3h15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LEREPO4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LEREPO4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zc3h15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LEREPO4の機能に不可欠なZc3h15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zc3h15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LEREPO4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLEREPO4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zc3h15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LEREPO4 HDRプラスミド（m）および LEREPO4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZc3h15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZc3h15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。