Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LC3B Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426563-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LC3BO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LC3B (m) e o Plasmídeo Double Nickase LC3B (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Map1lc3b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LC3B Anticorpo (G-9): sc-376404
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LC3B Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LC3B Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-426563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Map1lc3b de camundongo codifica a proteína associada a microtúbulos 1, cadeia leve 3 beta (LC3B), um componente central da maquinaria de autofagia que sofre lipidação para formar LC3-II e se associar às membranas dos autofagossomos. A LC3B favorece a expansão do fagóforo, a maturação do autofagossomo e a degradação seletiva de cargas por meio de interações com receptores que contêm LIR, como p62/SQSTM1, conectando substratos ubiquitinados ao sequestro autofágico. Como um marcador amplamente utilizado do fluxo autofágico, a LC3B é central em vias de proteostase dependentes de lisossomos que se interligam com o controle de qualidade mitocondrial, a sinalização imune inata e respostas ao estresse celular. A desregulação da autofagia associada à LC3B tem sido implicada em mecanismos relevantes para neurodegeneração, estados inflamatórios, biologia de infecções e adaptação de células cancerosas, tornando Map1lc3b um alvo comum para investigação de vias.
LC3B O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Map1lc3b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Map1lc3b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Map1lc3b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Map1lc3b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.