LBP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402651-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LBPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LBP (h) e o Plasmídeo Double Nickase LBP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LBP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LBP Anticorpo (4E8): sc-293253
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LBP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LBP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína ligadora de lipopolissacarídeo (LBP) é uma glicoproteína solúvel de fase aguda que se liga ao lipopolissacarídeo bacteriano e facilita sua transferência para o CD14 e para o complexo receptor TLR4/MD-2, amplificando o reconhecimento imune inato de bactérias Gram-negativas. Por meio dessa função de apresentação de LPS, a LBP contribui para a ativação do NF-κB e de programas de citocinas inflamatórias a jusante que moldam o recrutamento de leucócitos e as respostas inflamatórias sistêmicas. A expressão de LBP é regulada por sinais inflamatórios e é frequentemente usada como marcador de exposição a endotoxina, o que a vincula a estudos de interações hospedeiro–micróbio e de homeostase imunológica. A atividade ou a abundância desregulada de LBP tem sido associada a fenótipos inflamatórios e à fisiopatologia relacionada a infecções, tornando-a relevante para trabalhos mecanísticos em imunologia e em modelos de inflamação metabólica.
LBP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LBP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LBP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LBP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.