Laminin γ-2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401068-LAC

LAMC2 codifica a cadeia γ2 da laminina, um componente-chave da laminina-332 nas membranas basais que sustenta a adesão epitelial, a polaridade e a integridade tecidual. Por meio de interações com integrinas como α3β1 e α6β4, a laminina γ2 contribui para a sinalização de adesão focal, a organização de hemidesmossomos e vias a jusante, incluindo FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, que regulam migração e sobrevivência. O processamento proteolítico da laminina-332 pode gerar fragmentos promotores de motilidade, ligando a LAMC2 ao remodelamento dinâmico da matriz extracelular durante o reparo de feridas. A expressão desregulada de LAMC2 e a montagem alterada da laminina-332 são frequentemente estudadas em defeitos da barreira epitelial e em programas de invasão associados a tumores como biomarcadores de ruptura da membrana basal.

As Partículas de Ativação Lentivirais Laminin γ-2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de LAMC2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Laminin γ-2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição LAMC2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Laminin γ-2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo LAMC2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.