Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
L-type Ca++ CP β2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403900-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- L-type Ca++ CP β2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase L-type Ca++ CP β2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase L-type Ca++ CP β2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CACNB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:L-type Ca++ CP β2 Anticorpo (F-29): sc-81890
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
L-type Ca++ CP β2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403900-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-type Ca++ CP β2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403900-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNB2 codifica a subunidade auxiliar β2 dos canais de cálcio do tipo L dependentes de voltagem, regulando o tráfego do canal, sua expressão na membrana e a cinética de abertura/fechamento que molda o influxo de Ca2+ durante a despolarização. Ao ajustar a atividade dos canais CaV1, CACNB2 influencia o acoplamento excitação–contração, a transmissão sináptica e a regulação gênica dependente de atividade por meio de vias sensíveis ao cálcio, como a CaMK e a sinalização calcineurina/NFAT. Alterações na função de CACNB2 têm sido associadas a anormalidades elétricas e de sinalização em tecidos excitáveis e são frequentemente estudadas no contexto da suscetibilidade a arritmias, fenótipos neuropsiquiátricos e outros distúrbios relacionados a canais de cálcio. Como subunidade acessória, a β2 também afeta a sensibilidade farmacológica e as propriedades biofísicas das correntes de Ca2+ do tipo L, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de canalopatias.
L-type Ca++ CP β2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CACNB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CACNB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CACNB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CACNB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.