Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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L-type Ca++ CP α1D Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401745-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- L-type Ca++ CP α1DO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase L-type Ca++ CP α1D (h) e o Plasmídeo Double Nickase L-type Ca++ CP α1D (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CACNA1D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:L-type Ca++ CP α1D Anticorpo (E-3): sc-515679
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
L-type Ca++ CP α1D Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401745-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-type Ca++ CP α1D Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401745-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1D codifica a subunidade α1D formadora do poro dos canais de cálcio do tipo L dependentes de voltagem (CaV1.3), que medeiam o influxo de Ca2+ evocado pela despolarização da membrana e modulam o acoplamento entre excitação e transcrição. A entrada de cálcio dependente de CaV1.3 regula padrões de disparo neuronal, secreção hormonal e expressão gênica dependente de atividade por meio da sinalização Ca2+/calmodulina e de vias a jusante como CaMK e calcineurina/NFAT. Em tecidos excitáveis, CACNA1D contribui para o comportamento marcapasso e para a plasticidade sináptica e transcricional dependente de cálcio. A desregulação ou variação genética em CACNA1D tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como à fisiologia endócrina e cardiovascular, sustentando sua relevância em biologia de canais iônicos e em estudos de mecanismos de doença.
L-type Ca++ CP α1D O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CACNA1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CACNA1D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CACNA1D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CACNA1D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.