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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
L-type Ca++ CP α1C Plasmídeo de ativação de CRISPR (h) | sc-401062-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
L-type Ca++ CP α1C Plasmídeo de ativação de CRISPR (h2) | sc-401062-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
CACNA1C codifica a subunidade α1C formadora do poro do canal de Ca2+ tipo L CaV1.2, um mediador principal do influxo de cálcio dependente de voltagem em células humanas excitáveis e não excitáveis. A abertura do canal acopla a despolarização da membrana à sinalização intracelular de Ca2+, moldando o acoplamento excitação–contração, a atividade marcapasso e a transcrição dependente de atividade por meio de vias como CaM/CaMK e calcineurina–NFAT. A entrada de cálcio dependente de CaV1.2 também regula a dinâmica de liberação de neurotransmissores e a plasticidade sináptica via efetores sensíveis ao cálcio e programas de expressão gênica a jusante. A variação genética ou a expressão desregulada de CACNA1C tem sido associada a alterações de eletrofisiologia e da homeostase de cálcio em contextos de doenças cardiovasculares e neuropsiquiátricas, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de sinalização e excitabilidade celular.
L-type Ca++ CP α1C O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de CACNA1C sem alterar a sequência de ADN subjacente.
L-type Ca++ CP α1C O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus CACNA1C em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição CACNA1C, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de L-type Ca++ CP α1C. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus CACNA1C nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de L-type Ca++ CP α1C no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via L-type Ca++ CP α1C em células tumorais com expressão de CACNA1C silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.