L-ficolin Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-404837-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- L-ficolinO plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase L-ficolin (h2) e o Plasmídeo Double Nickase L-ficolin (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FCN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:L-ficolin Anticorpo (FCN219): sc-130297
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
L-ficolin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O FCN2 humano codifica a L-ficolina, uma lectina solúvel de reconhecimento de padrões produzida principalmente pelo fígado, que inicia a via das lectinas do complemento ao ligar-se a motivos de carboidratos de microrganismos e de estruturas próprias alteradas e ao recrutar proteases MASP, promovendo a ativação de C4/C2, a opsonização e a sinalização inflamatória. Por meio da modulação da depuração dependente do complemento, da aglutinação e do engajamento de fagócitos, a L-ficolina contribui para a homeostase da imunidade inata na interface entre infecção e inflamação estéril. Variações genéticas ou a expressão desregulada de FCN2 têm sido associadas a suscetibilidade alterada a doenças infecciosas e a fenótipos inflamatórios, sustentando seu uso como um nó molecular que conecta a atividade do complemento, as respostas hepáticas de fase aguda e as interações hospedeiro–patógeno. Modelos de edição gênica ou de perturbação de FCN2 permitem estudos mecanísticos da ativação do complemento pela via das lectinas, do reconhecimento dependente de glicanos e das vias efetoras imunes a jusante em sistemas celulares e in vitro relevantes.
L-ficolin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FCN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FCN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FCN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FCN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.