KV6.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413962
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KV6.3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KV6.3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KV6.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-413962 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNG4 codifica a subunidade Kv6.3, um membro eletricamente silencioso da família de canais de potássio dependentes de voltagem, que modula a excitabilidade da membrana ao formar heterotetrâmeros com subunidades α de canais Kv2. Por meio desse papel modulador, Kv6.3 influencia a forma de onda do potencial de ação, os limiares de disparo e a cinética de repolarização, integrando-se à homeostase iônica e a processos de sinalização associados à excitabilidade. A expressão de KCNG4 foi relatada em tecidos excitáveis e é relevante para vias que regulam a sinalização neuronal e sensorial, bem como o comportamento elétrico do músculo liso. A desregulação de moduladores de canais de potássio está amplamente implicada em distúrbios de excitabilidade, sustentando KCNG4 como um alvo para estudos mecanísticos da composição e função de canais iônicos em modelos celulares relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KV6.3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNG4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNG4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNG4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KV6.3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNG4 para a investigação da sinalização de KV6.3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNG4 críticos para a função KV6.3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNG4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KV6.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KV6.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNG4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KV6.3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KV6.3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNG4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNG4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.