KV1.6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409638

Visão geral

KCNA6 codifica a subunidade do canal de potássio dependente de voltagem KV1.6, um retificador tardio relacionado à família Shaker que molda a repolarização do potencial de ação e regula a frequência de disparo neuronal. Ao contribuir para a estabilidade e a excitabilidade do potencial de membrana, o KV1.6 influencia a sinalização sináptica e as oscilações de rede, integrando-se a processos de sinalização elétrica controlados pelo fluxo de íons dependente de voltagem. Os canais da família KV1 participam de vias que modulam a liberação de neurotransmissores, a condução axonal e a excitabilidade dependente da atividade, e alterações na condutância de potássio são amplamente relevantes para distúrbios de hiperexcitabilidade neuronal. Variações ou expressão desregulada em genes de canais de K⁺ dependentes de voltagem têm sido associadas a fenótipos neurológicos, sustentando o uso da perturbação de KCNA6 para estudar mecanismos ligados à excitabilidade em modelos celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KV1.6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNA6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNA6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNA6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KV1.6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNA6 para a investigação da sinalização de KV1.6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNA6 críticos para a função KV1.6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNA6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KV1.6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KV1.6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNA6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KV1.6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KV1.6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNA6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNA6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.