Ksr-2 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-402872-LAC-2

ヒトKSR2（kinase suppressor of Ras 2）はKsr-2をコードしており、Ksr-2はRAS下流のRAF–MEK–ERKシグナル伝達を編成する足場／調節性の擬似キナーゼとして、MAPK経路の振幅、持続時間、細胞内局在を調整する。さらにKsr-2はAMPK関連ネットワークとの相互作用を介して細胞のエネルギー・栄養状態のシグナルも統合し、増殖因子シグナルを代謝恒常性、ミトコンドリア機能、エネルギーストレスに対する適応応答へと結び付ける。遺伝学的・機能的研究からは、KSR2の撹乱が重度肥満やインスリン抵抗性など、エネルギーバランスおよび神経内分泌制御の異常と関連することが示されており、シグナルと代謝の協調におけるその役割が浮き彫りになっている。KSR2の遺伝子編集試薬は、関連するヒト細胞モデルにおいてMAPKとAMPKのクロストーク、経路の再配線、細胞種特異的な制御の機構解明を可能にする。

Ksr-2 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なKSR2の発現上昇を可能にします。

Ksr-2 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、KSR2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Ksr-2の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のKSR2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。