
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Ksr-1 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-401768-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 KSR1 유전자는 RAF, MEK, ERK를 조율해 MAPK/ERK 신호전달의 강도와 지속 시간을 조절하는 스캐폴드 단백질 Ksr-1을 암호화한다. Ksr-1은 특정 세포내 위치에서 키나아제 복합체를 조직함으로써 성장인자 반응성 증식, 분화, 세포주기 진행, 생존 프로그램에 영향을 미친다. KSR1에 의한 ERK 경로 출력의 미세 조정은 피드백 조절, 수용체 티로신 키나아제 입력, 스트레스 반응성 신호 노드와 교차한다. KSR1이 관여하는 MAPK 경로 활성의 이상 조절은 종양성 신호전달, 침윤성 표현형, 변화된 세포 가소성과 관련된 맥락에서 연구되어 왔으며, 암 생물학 및 신호전달의 기전 연구에서 그 중요성을 뒷받침한다.
Ksr-1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 KSR1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
Ksr-1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 KSR1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 KSR1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 Ksr-1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 KSR1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 Ksr-1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 KSR1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 Ksr-1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.