KLRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409220

Visão geral

KLRG1 (receptor G1 semelhante a lectina de células NK) é um receptor inibitório expresso em subpopulações de células NK humanas e de células T efetoras/de memória, no qual ajuda a calibrar a citotoxicidade e a produção de citocinas durante a vigilância imunológica. Ao ligar-se a caderinas como a E-caderina, o KLRG1 transmite sinalização inibitória que influencia os limiares de ativação, a diferenciação celular e características de exaustão e senescência imunes. O KLRG1 é amplamente utilizado como marcador para fenotipar populações de linfócitos terminalmente diferenciadas e para acompanhar respostas induzidas por antígeno em infeções crónicas, inflamação e microambientes tumorais. Assim, uma modulação desregulada do “tom” inibitório associado ao KLRG1 é relevante para estudos de imunossupressão, residência tecidual e vias do tipo checkpoint que moldam a imunidade antiviral e antitumoral.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KLRG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLRG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLRG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLRG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KLRG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLRG1 para a investigação da sinalização de KLRG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLRG1 críticos para a função KLRG1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLRG1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KLRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KLRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLRG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KLRG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KLRG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLRG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLRG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.