KLHDC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410067-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KLHDC5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KLHDC5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KLHDC5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KLHL42. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KLHDC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410067-NIC | 20 µg | $410.00 |
KLHL42 codifica o membro 42 da família kelch-like, uma proteína com domínios BTB–BACK–Kelch que provavelmente atua como adaptadora de substratos em complexos de ligase E3 de ubiquitina baseados em Cullin 3 (CUL3), contribuindo para a proteostase dependente de ubiquitina. Por meio do recrutamento seletivo de substratos proteicos para ubiquitinação e degradação, as proteínas kelch-like influenciam a organização do citoesqueleto, as respostas ao estresse celular e a homeostase de redes de sinalização. A desregulação das vias ubiquitina–proteassoma é amplamente relevante para a estabilidade do genoma, o controle do ciclo celular e a sinalização oncogênica, tornando o KLHL42 de interesse para estudos mecanísticos do controle de qualidade proteica em células humanas. Investigar o KLHL42 pode ajudar a esclarecer como adaptadores BTB–Kelch moldam programas de degradação específicos do contexto e os fenótipos associados.
KLHDC5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KLHL42 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KLHL42. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KLHL42. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KLHL42 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.